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原代细胞是来源于胚胎、组织器官及外周血样本经特殊实验方法处理而制备的原初培养细胞,这一过程被称为原代细胞分离。原代细胞具有保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。
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细胞的分离纯化和细胞培养技术是细胞生物学实验的基础,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞。原代细胞培养是指将组织从动物体内取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法剪碎处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖的过程。
原代细胞分离和培养项目 | ||
大鼠骨髓间充质干细胞原代培养 | 小鼠海马神经元细胞原代分离培养 | 细胞传代培养 |
大鼠膝关节软骨细胞的原代培养 | 心肌成纤维细胞(CFs)原代培养 | 内皮细胞培养 |
大鼠脂肪间充质干细胞原代培养 | 骨髓内皮组细胞原代培养 | 胃上皮细胞培养 |
脂肪/骨髓/牙源间充质干细胞 | 小鼠海马/大鼠脊髓神经元细胞 | 神经元细胞培养 |
人眼眶/大鼠心肌成纤维细胞 | 乳鼠心肌细胞培养操作 | 滑膜细胞原代培养 |
牛视网膜/小鼠脑微血管内皮细胞 | 大白兔/大鼠膝关节软骨细胞 | 小鼠巨噬、小胶质/大鼠肝细胞 |
原代细胞分离与培养方法
悬浮细胞的分离方法:组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。
实体组织材料的分离方法:对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
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